小鼠成纤维细胞生长因子21(FGF-21)是成纤维细胞生长因子家族中一种独特的内分泌型调节因子。与传统的旁分泌型 FGF 不同,小鼠 FGF-21 缺乏典型的肝素结合结构域,可以释放入血并以内分泌的形式对远隔靶器官起作用。FGF-21 在体内的生物学功能高度依赖于共受体单次跨膜蛋白 β-Klotho(BKL)的存在。通过与 β-Klotho 及成纤维细胞生长因子受体(主要为 FGFR1c)形成三元复合物,FGF-21 可激活细胞内 FRS2α-Ras-MAPK(p-ERK1/2)及 PI3K-Akt 信号级联反应。FGF-21 在维持糖脂代谢稳态、肥胖、白色脂肪棕色化以及线粒体功能中扮演着核心角色,已被广泛用于非酒精性脂肪性肝病(NASH)、2 型糖尿病、肥胖症及炎症等疾病机制研究与药物靶点验证。在体外实验中,FGF-21 常用于诱导 3T3-L1 脂肪细胞摄取葡萄糖及激活信号通路磷酸化。为保障实验数据的精准与高还原性,本文系统整理了体外实验中 FGF-21 的结构特性、作用机制、核心体外检测原理、试剂耗材准备、标准操作流程及关键注意事项。