一、导语
做PDGF-DD研究,样品环节常遇四类麻烦:想特异性激活PDGFRβ,拿到的蛋白受体选择性不清;PDGF家族依赖链间二硫键与正确的二聚体折叠,原核表达易失活;细胞实验对痕量内毒素敏感,LPS背景会带来假阳性读出;从预实验到放大,又需要多规格灵活选择。本文介绍苏州丰度蛋白的Human PDGF-DD(FX0658系列)及其适用研究方向,帮助你在选型阶段少走弯路。
二、靶点背景速览
PDGF-DD是PDGF家族D链的同源二聚体(UniProt Q9GZP0-1),分泌型生长因子,成熟形式由两个亚基经链间二硫键连接。它以潜伏形式分泌,N端CUB结构域遮蔽受体结合位点,需经蛋白酶(如uPA)胞外切除后才暴露活性——本品的片段250–370 aa对应的正是切除后的成熟活性域,无需额外活化步骤即可用于受体激活实验。
激活后的信号链清晰:PDGF-DD特异性结合并激活PDGFRβ同源二聚体(β/β),不激活PDGFRα,经RAS–MAPK驱动增殖、PI3K–AKT支持存活与迁移。典型研究方向包括:周细胞 / 血管平滑肌趋化与覆盖、血管生成与血管成熟、创面修复、组织纤维化、肿瘤自分泌 / 旁分泌增殖迁移,以及缺血后神经血管保护。
三、现货产品介绍
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项目 |
内容 |
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品名 / 货号 |
Human PDGF-DD,系列FX0658 |
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分子量 / 反应物种 |
19 kDa / Human |
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纯度 / 内毒素 |
纯度>95% / 内毒素<0.1 EU/μg |
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UniProt / 表达系统 |
Q9GZP0-1 / 293F(真核) |
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片段 / 标签 |
250–370 aa / N-His |
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剂型 |
0.22 μm滤膜冻干,用前离心 |
核心卖点①:293F真核表达,利于二硫键正确形成与二聚体折叠,更贴近天然配体构象;
核心卖点②:N-His标签,便于纯化追踪、anti-His检测与定向包被;
核心卖点③:纯度>95%、内毒素<0.1 EU/μg,低内毒素适配细胞培养;
核心卖点④:四种规格现货即订即发,覆盖小试到放大。
四、适用研究方向(候选,以产品页 / COA核实为准)
· PDGFRβ磷酸化激活与通路验证(p-PDGFRβ / p-ERK / p-AKT);
· 周细胞、血管平滑肌、成纤维细胞等PDGFRβ阳性细胞的增殖 / 迁移刺激;
· 血管生成与周细胞覆盖(内皮–周细胞共培养体系);
· 创面修复与组织纤维化模型;
· 肿瘤增殖与迁移(自分泌 / 旁分泌)研究;
· 受体结合 / ELISA、免疫原与抗体制备。
口径说明:以上为基于靶点生物学的候选方向,未经验证的应用请勿在论文中表述为“已应用”。
五、选型常见问题FAQ
Q1:PDGF-DD为什么主要激活PDGFRβ而非PDGFRα?
受体选择性由配体的受体结合结构域残基决定:A链偏好PDGFRα,B链α/β均可激活,而D链成熟后只识别PDGFRβ。需要“只动PDGFRβ、不牵连α”时,PDGF-DD比PDGF-BB更干净;若体系表达PDGFRα,也不会引入混杂信号。
Q2:293F真核表达对PDGF二聚体有什么优势?
PDGF-DD的受体结合依赖正确的二聚体构象与二硫键配对。原核体系易出现二硫键错配、折叠异常,活性明显偏低;293F体系在胞内完成正确的氧化折叠与二聚体组装,配合滤膜冻干剂型,从“折叠正确”到“无菌易储运”形成完整链条。
Q3:19 kDa是单体还是二聚体?
还原SDS-PAGE看到的是亚基条带,非还原条件下应观察到接近两倍的二聚体条带;若非还原仍只有单体条带,提示二聚体未正确形成,不宜直接用于受体激活。批次结果以COA为准。
Q4:细胞实验为什么关注内毒素?
极低浓度LPS即可经TLR4引起非特异性增殖与炎症分泌,与生长因子真实效应混淆。<0.1 EU/μg属细胞培养级标准,可将LPS背景压到可忽略水平;建议同步设置载体对照。
Q5:四个规格怎么选?
10 μg用于可行性验证与小体系预实验;20 μg支撑单一方向机制实验;50 μg适配多浓度 / 多时间点完整功能实验;100 μg适合放大与重复验证。功能实验常用浓度在ng/mL量级,建议按“预实验用量×3”估算,多次实验尽量用同一批次。