一、产品概述
重组小鼠白血病抑制因子（Recombinant Mouse Leukemia Inhibitory Factor, rMuLIF）
产品货号：FD0048。表达系统：中国仓鼠卵巢细胞（CHO 真核表达系统）。分子特征：成熟肽片段（Ser24–Phe203），天然折叠，Tag-free（无标签）。
产品定位：小鼠同源高活性（ED50≤0.2 ng/mL）、无标签重组小鼠 LIF 蛋白质，是小鼠胚胎干细胞（mESC）与诱导多能干细胞（m-iPSC）未分化多能性维持及无滋养层培养基配制的标配核心因子。
二、靶点背景：LIF 与小鼠干细胞培养
2.1 分子身份与结构特征
小鼠白血病抑制因子（mLIF）属于 IL-6 家族糖基化细胞因子。小鼠成熟 LIF 蛋白由 Ser24 至 Phe203 共 180 个氨基酸残基组成，理论分子量约为 19.9 kDa（UniProt 登录号：P09056）。最初因能诱导小鼠髓系白血病 M1 细胞停止增殖并定向分化为巨噬细胞而得名。至今，M1 细胞分化抑制/诱导实验仍是国际通用的检测小鼠 LIF 生物活性的金标准模型。
2.2 受体与信号转导
小鼠 LIF 的作用机制依赖于小鼠细胞膜表面的高亲和力受体复合物：
受体复合物形成：mLIF 与 mLIFRβ 结合后招募 gp130，形成异二聚体信号传导复合物。
核心信号级联：
JAK-STAT3 通路（核心驱动力）：激活的 STAT3 发生磷酸化（p-STAT3）并入核，直接维持 Oct4、Sox2、Nanog 及 Klf4 等干细胞多能性网络的高水平表达。
PI3K-AKT & MAPK/ERK 通路：协同调控 mESC 细胞存活及自我更新。
2.3 为什么小鼠源 LIF 是 mESC 培养的标配？
小鼠胚胎干细胞的多能性状态高度依赖于 LIF-STAT3 信号轴。在无滋养层（Feeder-free）或低滋养层培养体系中，添加同源小鼠 LIF（FD0048）能以最佳的同源受体亲和力提供持续稳定的 STAT3 激活信号，有效防止 mESC/iPSC 发生自发分化与形态异变。
2.4 研究价值
适用于小鼠干细胞与再生医学、类器官构建、神经干细胞诱导、基因剔除小鼠模型构建以及无血清干细胞培养基的开发。
三、产品设计与核心优势
小鼠同源序列与高亲和力：与小鼠源干细胞表面的 LIFRβ/gp130 受体复合物天然匹配，相比异源因子能提供更稳定、持久的信号刺激。
真核 CHO 表达系统：拥有完整的 Post-translational Modifications（糖基化），蛋白水溶性好，在 37 ℃ 培养箱中比大肠杆菌表达产品具有更长的生物学半衰期。
Tag-free 无标签成熟肽：完全去除信号肽（Ser24–Phe203），不含 His/GST/Flag 标签，避免外源序列干扰干细胞分化命运或引发背景免疫荧光。
经典 M1 细胞分化活性验证：每批次严格经过小鼠 M1 细胞分化 Assay 验证，确保生物活性 ED50≤0.2 ng/mL（即比活性≥5×10⁶ U/mg）。
跨种产品配套选择：与重组人 LIF（FD0047）同属一个系列，方便科研人员根据小鼠或人源细胞系进行精准选型。
四、规格与订购表
4.1 FD0048 订购信息
FD0048 规格与订购
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货号 |
规格 |
表达系统 |
纯度 |
建议用途 |
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FD0048 10 |
10 µg |
CHO |
≥95% |
条件摸索 / 小量实验 |
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FD0048 50 |
50 µg |
CHO |
≥95% |
常规 mESC/iPSC 培养 |
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FD0048 1000 |
1 mg |
CHO |
≥95% |
规模化培养 / 培养基开发 |
订购须知：批量采购（≥10 mg）或批量培养基开发需求，请联系客服获取工业级大包装报价。
4.2 人/小鼠 LIF 产品选型对照表
人/小鼠 LIF 产品选型对照
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对照维度 |
重组小鼠 LIF (FD0048) |
重组人 LIF (FD0047) |
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物种来源 |
小鼠源 (Mouse) |
人源 (Human) |
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序列范围 |
Ser24–Phe203 (~19.9 kDa) |
Ser23–Phe202 (~19.7 kDa) |
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首选应用细胞 |
小鼠 ESC / 小鼠 iPSC |
人 ESC / 人 iPSC / 人神经干细胞 |
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活性检测模型 |
M1 细胞分化 Assay (ED50≤0.2 ng/mL) |
TF-1 细胞增殖 Assay (ED50≤0.1 ng/mL) |
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跨种交叉活性 |
对人源细胞活性较低（不推荐用于人 stem cell） |
对小鼠源细胞有较强交叉活性 |
五、技术参数总表
技术参数总表
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参数项 |
技术指标与规格细节 |
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英文名称 |
Recombinant Mouse Leukemia Inhibitory Factor (rMuLIF) |
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中文名称 |
重组小鼠白血病抑制因子 |
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物种来源 |
小鼠 (Mouse) |
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表达宿主 |
CHO 细胞 |
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氨基酸片段 |
Ser24–Phe203（成熟肽，UniProt: P09056） |
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融合标签 |
无标签 (Tag-free) |
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表观分子量 |
还原 SDS-PAGE 下约为 19.9–25 kDa（受糖基化修饰影响呈微小条带偏移） |
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蛋白纯度 |
≥95%（经 SDS-PAGE 及 SEC-HPLC 分析） |
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内毒素水平 |
≤10 EU/mg（LAL 凝胶法测定） |
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冻干缓冲基质 |
无菌 PBS, 5% 甘露醇, 0.01% Tween-20, pH 7.4 |
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生物活性 |
基于小鼠 M1 细胞分化 Assay，ED50≤0.2 ng/mL（比活性≥5×10⁶ U/mg） |
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复溶建议 |
使用无菌去离子水复溶至 0.1–0.5 mg/mL 母液 |
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产品形态 |
白色疏松冻干粉末 |
六、质量控制（QC）
纯度鉴定：每一批次均经过 SDS-PAGE 还原电泳，主峰条带清晰，纯度大于 95%。
内毒素控制：采用 LAL 显色法检测，内毒素控制在≤10 EU/mg，确保干细胞无毒性应答。
生物活性逐批标定：以小鼠 M1 髓系白血病细胞为检定模型，通过剂量依赖性诱导 M1 细胞分化/抑制增殖，标定 ED50≤0.2 ng/mL。
随货 CoA：随货提供质检报告（CoA），包含实测纯度、内毒素与活性测定结果。
七、使用指南
7.1 复溶 SOP（标准操作规程）
瞬时离心：使用前将冻干粉管于 10,000 rpm 离心 30 秒，使散落粉末集聚于管底。
复溶母液配置：
加入无菌去离子水或无菌 PBS（建议添加 0.1% 载体蛋白如 BSA/HSA 以防止管壁吸附），配置成 0.1–0.5 mg/mL 的母液（例如：50 µg 加入 500 µL 液体，即得 0.1 mg/mL 母液）。
轻轻颠倒混匀，置于室温静置 10 分钟至完全溶解，切勿剧烈 Vortex 振荡。
分装冻存：按单次实验用量分装后，置于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 冻存。
7.2 推荐使用场景与终浓度
推荐使用场景与终浓度
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实验体系 |
推荐终浓度范围 |
使用建议 / 备注 |
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mESC / m-iPSC 无滋养层培养 |
10 ng/mL（相当于 1000 U/mL） |
建议与含有 15% KSR 或 2i（CHIR99021 + PD0325901）体系结合使用 |
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M1 细胞分化 Assay |
0.1–10 ng/mL |
用于生物活性检定或阳性对照 |
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小鼠类器官 / 神经前体细胞培养 |
10–20 ng/mL |
根据具体 Differentiation Protocol 摸索 |
7.4 保存与稳定性
冻干粉末：在 -20 ℃ 或 -80 ℃ 干燥避光条件下，可稳定保存 12 个月。
复溶母液：
短期保存：2–8 ℃ 无菌条件下可保存 7 天。
长期保存：分装后置于 -20 ℃ 或 -80 ℃ 可保存 3–6 个月。请避免反复冻融！
八、核心应用场景
小鼠 ESC / iPSC 多能性维持（核心应用）：在无滋养层（Feeder-free）培养体系中添加 FD0048，持续激活 STAT3 通路，维持 mESC 克隆呈现紧密、圆润的未分化形态，并高表达 Oct4/Sox2/Nanog。
小鼠类器官与干细胞扩增：作为小鼠源上皮类器官或成体干细胞扩增培养基中的关键组分。
M1 髓系白血病细胞分化模型：研究白血病细胞系向巨噬细胞定向分化的信号机制及药物筛选。
神经科学研究：诱导神经前体细胞（NPCs）向星形胶质细胞分化。
无血清 / 化学成分限定培养基开发：为科研机构及培养基企业提供同源、高批次稳定性的底物因子。
LIF-STAT3 信号通路研究：研究小鼠受体复合物（LIFRβ/gp130）激活机制及上游/下游抑制剂筛选。
九、常见问题解答（FAQ）
Q1：小鼠 LIF（FD0048）与人 LIF（FD0047）应该如何选型？
答：建议根据您的干细胞物种来源进行选型：
如果您的实验体系是小鼠胚胎干细胞（mESC）或小鼠 iPSC，请首选小鼠 LIF（FD0048），其小鼠同源受体亲和力更佳；
如果您的实验体系是人源 ESC / iPSC 或人神经干细胞，请务必选择人源 LIF（FD0047）。人源 LIF 也可用于小鼠细胞，但小鼠 LIF 对人源细胞活性较低。
Q2：在无滋养层（Feeder-free）mESC 培养中，LIF 的推荐工作浓度是多少？
答：标准推荐工作浓度为 10 ng/mL（相当于 1000 U/mL）。在 2i（CHIR99021 + PD0325901）或基于 KSR 的无血清培养体系中，10 ng/mL 的 FD0048 即可完美维持 mESC 呈未分化圆形克隆形态。
Q3：Tag-free（无标签）小鼠 LIF 如何在 Western Blot 中检测？
答：由于 FD0048 不含 His/GST 标签，不能使用 Tag 抗体。检测时请使用特异性识别小鼠 LIF 的抗 mLIF 单克隆或多克隆抗体（建议参照抗体厂商推荐的 WB 稀释比例）。
Q4：复溶后的产品可以反复冻融吗？
答：不可以。反复冻融会导致重组蛋白三级结构破坏及生物活性显著下降。复溶后请务必根据单次实验用量（如 5–10 µL/管）分装冻存于 -20 ℃ 或 -80 ℃。
Q5：LIF 在 mESC 培养基中如何与其他因子（如 bFGF、KSR）配合使用？
答：在小鼠 ESC 培养体系中，LIF 是核心多能性维持因子（通常配合 KSR 或 15% FBS）；需要注意，小鼠 ESC 与人 ESC 不同，小鼠 ESC 培养基中通常不需要添加 bFGF（FGF2），因为 bFGF 可能会促使小鼠 ESC 发生分化。
