一、产品概述

产品全称：Recombinant Human PDGF-C Growth Factor Domain Fc-His Fusion Protein（重组人血小板源性生长因子 C 生长因子结构域 Fc-His 融合蛋白）

核心卖点：

【成熟活性区段】覆盖 Val235–Gly345 氨基酸区段（成熟 GFD），直接暴露受体结合位点，无须蛋白酶前体加工

【Fc 介导二聚化】N 端融合 hFc 驱动形成稳定同源二聚体，完全复刻天然 PDGF-CC 配体对受体的双价交联激活能力

【高纯低毒】SDS-PAGE 纯度 >95%，内毒素 <0.1 EU/μg，适配原代细胞与干细胞培养

【真核 293F 表达】具备天然二硫键正确折叠与糖基化修饰，保证高生物学活性

【梯度规格】提供 10 μg 至 100 μg 四档规格，满足从小试摸索到高通量筛选的多样化需求

二、靶点背景：PDGF-C / PDGF-CC

2.1 家族归属与分子结构

血小板源性生长因子（PDGF）家族包含五种二聚体配体（PDGF-AA、-BB、-AB、-CC、-DD）。其中，PDGF-C 与 PDGF-D 属于双结构域前体分子。

人全长 PDGF-C 前体蛋白（UniProt: Q9NRA1）包含：N 端 CUB 结构域（约 23–163 aa），作为空间位阻排斥受体结合；连接铰链区（Hinge Region），包含蛋白酶切位点；C 端生长因子结构域（GFD）（Val235–Gly345），包含 8 个保守的半胱氨酸残基，形成分子内与分子间二硫键。

分子结构简示：全长前体（无活性）由 N 端 CUB 结构域—铰链区—C 端 GFD 结构域组成，经 PLAT/Plasmin 剪切后释放成熟活性形式（本产品）：GFD–（二硫键）–GFD 同源二聚体，高亲和力激活 PDGFRα。

2.2 活化加工机制（Zymogen Cleavage）

PDGF-C 基因表达后以无活性的前体同源二聚体（Full-length PDGF-C）形式分泌至细胞外。在前体状态下，N 端的 CUB 结构域屏蔽了 GFD 上与受体结合的活性位点。

在组织损伤、创伤或炎症反应中，胞外蛋白酶（如组织型纤溶酶原激活剂 PLAT/tPA 或纤溶酶 Plasmin）特异性剪切铰链区，释放出无 CUB 约束的成熟 PDGF-C GFD 二聚体（即活性 PDGF-CC）。

本产品设计亮点：直接表达成熟 GFD 区段（Val235–Gly345），省去了体外或细胞实验中对前体蛋白酶切加工的繁琐步骤，可直接高效激活下游受体。

2.3 受体与信号通路

成熟的 PDGF-CC 能够特异性结合并强效激活 PDGFRα 同源二聚体（PDGFRαα），亦可在特定细胞表面结合并激活 PDGFRα/β 异源二聚体。

配体结合诱导受体发生自身磷酸化，进而招募下游信号分子，级联激活：PI3K / AKT 通路，促进细胞存活与抗凋亡；RAS / MAPK / ERK 通路，驱动细胞周期进展与有丝分裂（Mitogenesis）；PLCγ / PKC 通路，调控细胞骨架重塑与细胞迁移（Chemotaxis）。

2.4 生理与病理功能

器官发育与组织稳态：在胚胎期肾间质、中枢神经系统、血管壁平滑肌细胞及周细胞（Pericytes）发育中发挥关键作用。

脏器纤维化（Fibrosis）：PDGF-CC 是刺激肾脏系膜细胞（Mesangial cells）、肝星状细胞（HSC）、肺成纤维细胞活化并分泌 I 型胶原蛋白的核心促纤维化因子。

血管重塑与血脑屏障（BBB）：募集周细胞维持血管壁稳定性；在缺血性脑卒中模型中调控血脑屏障通透性。

肿瘤微环境（TME）：由肿瘤细胞或肿瘤关联成纤维细胞（CAF）分泌，促使肿瘤间质血管生成、基质硬化并诱导上皮-间质转化（EMT）。

三、产品设计与核心优势

精确锁定成熟活性区段（Val235–Gly345）

去除抑制性的 CUB 前体结构域，保留具有完整受体结合活性的 GFD 区域，确保加药后瞬间引发受体磷酸化。

N 端 Fc 融合介导同源二聚化

PDGF 的生物学活性严格依赖于二聚体结构。本产品在 GFD N 端融合人 IgG1 Fc 段，利用 Fc 链间的二硫键驱动 GFD 形成稳定的二聚体分子，显著提升受体交联效率与体外半衰期。

N 端 6×His 标签，方便鉴定

融合 His 标签，便于使用 Anti-His 抗体进行 Western Blot 表达鉴定或在 SPR/BLI 实验中通过 NTA 芯片定向捕获。

293F 真核表达系统

确保复杂的分子内/分子间二硫键正确配对（Disulfide-bond Folding），具备天然糖基化，活性显著高于原核大肠杆菌表达重构的蛋白。

超低内毒素与冻干制剂

内毒素 <0.1 EU/μg，经过 0.22 μm 过滤后冻干，无菌度高，保证原代成纤维细胞与干细胞无毒性反应。

四、规格与订购表

规格与订购表

注：实际成交价格与优惠活动请以官网下单页面为准。如需大包装（mg 级）或无 Fc 标签版本定制，请联系客服人员。

五、技术参数总表

技术参数总表

六、质量控制（QC）

每批次 FX0691 产品均需通过严苛的 QC 标准放行：

纯度与二聚体结构检测：还原 SDS-PAGE，纯度 >95%，单体分子量为 ~45 kDa；非还原 SDS-PAGE，确认分子的二聚化程度，非还原带 >80 kDa。

内毒素限量：使用动力学显色法鲎试剂（LAL）测定，内毒素水平严格在 <0.1 EU/μg 范围内。

标签与序列鉴定：通过 Western Blot 对 N 端 His 标签及人 Fc 标签进行双重阳性验证。

生物学活性测定：细胞增殖活性，使用 NIH3T3 细胞（表达内源性 PDGFRα），通过 CCK-8/CTG 法评估剂量-反应增殖曲线并计算 ED50；受体激活实验，使用 Western Blot 检测加药刺激后 PDGFRα（Tyr754）及下游 ERK1/2 的磷酸化水平。

批次分析证书（CoA）：每盒随货附带分析证书，包含批号、实测纯度、内毒素与 ED50 活性数据。

七、使用指南

7.1 复溶步骤（Reconstitution）

注意：开封前请务必先将离心管置于台式离心机中，以 ≥3000×g 瞬时离心 30 秒，使粘附在管壁及管帽上的冻干粉末沉降至管底。

复溶浓度：建议加入无菌蒸馏水或超纯水，将蛋白复溶至 0.1–0.5 mg/mL（例：向 20 μg 冻干粉中加入 100 μL 无菌水，即得 0.2 mg/mL 母液）。

温和溶解：室温静置 10–15 分钟使其充分水化。请勿剧烈涡旋（Vortex），防止剪切力破坏二聚体分子间二硫键，可通过轻柔颠倒混匀。

分装保存：复溶后的母液如不立即用完，建议加入含 0.1% BSA 的无菌 PBS 进行稀释分装。

7.2 典型应用与建议起始条件

细胞增殖实验（Proliferation Assay）：细胞预处理，将 NIH3T3 或成纤维细胞铺板，待贴壁后使用无血清培养基饥饿处理 12–16 小时；加药刺激，加入梯度稀释的 FX0691 蛋白（推荐起始浓度范围：0.1–100 ng/mL），孵育 48 小时后通过 CCK-8 测定吸光度。

受体磷酸化激活实验（Phosphorylation Assay）：刺激条件，细胞无血清饥饿过夜后，加入 10–50 ng/mL FX0691 蛋白，于 37 ℃ 孵育 5–15 分钟（磷酸化峰值通常在 10 min 左右）；样品采集，立即吸弃培养基，加入含蛋白酶及磷酸酶抑制剂的冰冷 RIPA 裂解液，收集蛋白进行 WB 检测（检测 p-PDGFRα、p-AKT、p-ERK）。

细胞迁移实验（Transwell / Wound Healing）：Transwell 下室加入含 10–50 ng/mL FX0691 的培养基，上室接种间充质细胞，孵育 12–24 小时后观察穿膜细胞数。

7.3 保存与稳定性

冻干粉状态：于 -20 ℃ 至 -80 ℃ 干燥避光保存，保质期 12 个月。

复溶后母液：短期保存，4 ℃ 无菌条件下可保存 2–7 天。长期保存，用含 0.1% BSA 或 5% 蔗糖的无菌 PBS 稀释分装后，置于 -80 ℃ 冻存，可保存 3–6 个月。

禁忌：切勿反复冻融（Avoid repeated freeze-thaw cycles）！不要在无保护蛋白（如 BSA）的极低浓度（<10 μg/mL）下长期冻存。

7.4 注意事项（Fc 融合蛋白特有）

同型对照设置：在表达 Fc 受体（FcγR）的细胞（如巨噬细胞、部分肿瘤细胞）中，建议设置人 IgG1 Fc 同型对照蛋白，以扣除 Fc 段产生的非特异性背景信号。

还原剂禁忌：储存及实验缓冲液中应避免混入高浓度还原剂（如 >1 mM DTT 或 >5 mM β-巯基乙醇），否则会破坏驱动二聚化的二硫键，导致蛋白单体化而丧失活性。

使用限制：本产品仅供科研使用（RUO），不可用于人体治疗或临床诊断。

八、应用场景

间充质源细胞生物学功能研究：诱导成纤维细胞、血管平滑肌细胞（VSMC）、周细胞及系膜细胞的定向增殖与迁移。

组织纤维化疾病模型（Fibrosis Research）：建立体外肾脏/肝脏/心脏成纤维细胞活化模型，研究 PDGFRα 通路在肌成纤维细胞（Myofibroblast）转分化中的机制。

血管生成与血脑屏障（BBB）调控：研究 PDGF-CC 介导的周细胞募集及血管内皮细胞间紧密连接（Tight Junctions）的重塑。

配体-受体结合与亲和力测定：作为高活性配体，用于 SPR / BLI 测定 PDGFRα 抗体或阻断剂的竞争效能。

抗体与小分子药物研发：作为靶向 PDGF-CC 或 PDGFRα 的中和抗体、小分子酪氨酸激酶抑制剂（TKI）筛选的阳性刺激因子。

发育与干细胞研究：维持中胚层干细胞定向分化及微环境构建。

九、常见问题（FAQ）

Q1：为什么本产品采用 Fc 融合形式？相比无标签成熟 GFD 有何优势？

答：天然 PDGF-CC 发挥功能必须形成二聚体以交联两个 PDGFRα 分子。单一的 GFD 单体缺乏足够的交联能力，活性极低。通过融合人 IgG1 Fc 段，利用 Fc 自然的二硫键作用迫使两个 GFD 形成稳定的同源二聚体，极大提高了受体交联效率与生物学活性；同时 Fc 标签赋予了蛋白极佳的体外溶解性与稳定度。

Q2：本产品是否需要额外的蛋白酶（如 Plasmin）进行切断活化？

答：完全不需要。天然全长 PDGF-C 含有 CUB 结构域，需要蛋白酶切除 CUB 后才能暴露受体结合位点。本产品（FX0691）在重组表达时已直接截取成熟的 GFD 结构域（Val235–Gly345），结合位点完全外露，直接加药即可强效激活受体。

Q3：PDGF-CC 优先激活 PDGFRα 还是 PDGFRβ？

答：成熟的 PDGF-CC 对 PDGFRα 表现出极高的选择性与亲和力，主要诱导形成 PDGFRαα 同源二聚体受体；在同时表达 α 和 β 受体的细胞（如周细胞、系膜细胞）表面，它亦可结合诱导 PDGFRα/β 异源二聚体，但对纯粹的 PDGFRββ 同源二聚体激活作用极弱。

Q4：实验中如何排除 Fc 段对细胞的非特异性影响？

答：如果在表达 FcγR 的免疫细胞（如巨噬细胞）中开展实验，Fc 段可能引发微弱的非特异结合。建议设立人 IgG1 Fc 同型对照蛋白（Isotype Control）组；若检测受体磷酸化（如 p-PDGFRα），由于非免疫细胞表面通常无 FcγR 表达，Fc 段通常不会产生背景信号。

Q5：为什么 SDS-PAGE 还原胶上的分子量（~45 kDa）与天然成熟 PDGF-C 肽段（~16 kDa）不同？

答：天然成熟 PDGF-C 单体肽段仅约 16 kDa。本产品在 GFD 的 N 端融合了人 IgG1 Fc 段及 His 标签（融合片段分子量约 28–30 kDa），因此融合蛋白单体的表观分子量为 ~45 kDa；在非还原条件下，由于 Fc 间二硫键的作用，它会呈现为 >80 kDa 的二聚体。

Q6：复溶后如果一次用不完，应该如何正确储存？

答：建议使用含 0.1% BSA 的无菌 PBS 将复溶后的母液稀释至适宜浓度（如 10 μg/mL），按单次实验用量分装（如每管 10 μL），置于 -80 ℃ 冻存。使用时解冻一管，避免反复冻融。