一、产品概述

产品全称：Recombinant Human MEPE / OF45 Protein, C-10×His Tag（重组人基质细胞外磷酸糖蛋白，C 端 10×His 标签）

大类货号：FX0689

产品类型：分泌型骨/牙基质糖蛋白重组蛋白（近全长区段 Pro18–Asp525，293F 真核表达系统）

核心卖点：

【真核表达】HEK293F 表达系统，翻译后修饰（糖基化/磷酸化）贴近天然分泌型骨基质蛋白

【近全长覆盖】涵盖 Pro18–Asp525 氨基酸区段，保留 C 端关键 ASARM 模体

【易于捕获】C 端融合 10×His 标签，方便镍柱纯化、检测及 SPR/BLI 定向偶联

【高纯低毒】SDS-PAGE 纯度 >90%，内毒素 <0.1 EU/μg，适配细胞培养与矿化诱导实验

【灵活规格】提供 10 μg 至 100 μg 梯度规格，满足小试筛选到规模化研究

二、靶点背景：MEPE/OF45 是什么

2.1 分子归属与结构特征

MEPE（Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein，基质细胞外磷酸糖蛋白，又称 OF45 / Osteoblast/Osteocyte Factor 45），属于 SIBLING 蛋白家族（Small Integrin-Binding Ligand N-linked Glycoprotein）。该家族还包括骨桥蛋白（OPN）、骨唾液蛋白（BSP）、牙本质基质蛋白 1（DMP1）以及牙本质磷蛋白（DSPP）。

MEPE 为分泌型非胶原骨基质糖蛋白，富含酸性丝氨酸和天冬氨酸。其 C 端包含一个高度保守的 ASARM 模体（Acidic Serine- and Aspartate-Rich Motif）。ASARM 模体经蛋白酶水解并发生磷酸化后，能够直接与羟基磷灰石晶体结合，发挥“矿化抑制因子（Minhibin）”的作用。

2.2 组织表达与定位

MEPE 主要由成骨细胞（Osteoblasts）、骨细胞（Osteocytes）及牙本质造牙细胞（Odontoblasts）特异性合成与分泌，定位于骨组织和牙本质的矿化基质微环境中。

2.3 核心生物学功能

基质矿化精细调控（抑制性调节）：MEPE 及其 C 端 ASARM 肽段能够结合钙离子与羟基磷灰石，阻止过度的结晶核化与生长，维持骨与牙本质基质矿化的动态平衡。

与 PHEX 蛋白的相互作用：锌内切肽酶 PHEX（Phosphate-regulating Neutral Endopeptidase）能够以非蛋白水解的方式特异性结合 MEPE 的 C 端 ASARM 区域，保护 MEPE 免受过度的限制性剪切，从而防止大量游离 ASARM 肽脱落导致的严重矿化障碍。

全身磷代谢网络（PHEX–MEPE–FGF23 轴）：MEPE 与 PHEX、FGF23 共同构成肾脏-骨骼磷代谢调节轴。在 XLH（X-连锁低磷性佝偻病）及 TIO（肿瘤源性骨软化症）等病理状态下，PHEX 功能缺失导致 MEPE 及 ASARM 肽在体内异常积聚，进而抑制肾小管对磷的重吸收并造成类骨质矿化障碍。

成骨分化与细胞粘附：参与构建成骨细胞微环境，通过基质相互作用调控骨重建（Bone Remodeling）。

2.4 研究与转化意义

骨代谢疾病机制：骨质疏松症、骨质硬化症、XLH 及 TIO 病理生理学研究。

口腔与牙体医学：牙本质再生、牙釉质修复及生物矿化材料设计。

药效评价工具：作为小分子阻断剂、中和抗体及磷代谢调节剂筛选的靶蛋白。

三、产品设计与核心优势

293F 真核表达系统，保留天然糖基化修饰

原核表达（如大肠杆菌）制备的 MEPE 缺乏 N-/O-糖基化修饰且易形成包含体。本产品采用 HEK293F 真核分泌表达，保留了天然骨基质蛋白的高糖基化特征，蛋白折叠及溶解性更优。

近全长序列覆盖（Pro18–Asp525）

完整包含从 Pro18 至 Asp525 的近全长成熟肽区段，保留了 RGD 模体及 C 端 ASARM 功能区，适合用于完整的结构-功能关系（SAR）研究及受体互作实验。

C 端 10×His 标签设计

相比常规 6×His，10×His 标签与镍柱/铜柱的结合亲和力更高，便于高纯度捕获；同时在 SPR/BLI 亲和力测定中可实现高密度的取向固定。

表观分子量为 82 kDa

由于 MEPE 含有大量的酸性氨基酸残基（导致 SDS-PAGE 结合 SDS 能力下降）及高度糖基化修饰，其表观分子量约为 82 kDa（预测无修饰肽链分子量约为 57 kDa），与天然分泌型 MEPE 的电泳行为完全一致。

超低内毒素与冻干稳定

内毒素水平严格控制在 <0.1 EU/μg，通过 0.22 μm 滤膜过滤后冻干，可长期储运并直接应用于细胞培养与矿化诱导体系。

四、规格与订购表

规格与订购表

注：实际成交价格与优惠活动请以官网下单页面为准。如需无标签版、单独 ASARM 多肽合成或超大规格（mg 级）定制，请联系客户服务部。

五、技术参数总表

技术参数总表

六、质量控制（QC）

每批次 FX0689 产品均经过标准化质控流程，确保科研数据的严谨性：

纯度与修饰检测：通过 SDS-PAGE 评估纯度（>90%），并监测高糖基化修饰特征所致的平缓展宽条带。

内毒素限量：使用动力学显色法鲎试剂（LAL）测定，确保内毒素在 <0.1 EU/μg 安全阈值内，避免干扰骨细胞培养。

身份与标签验证：通过抗 His 标签抗体及抗人 MEPE 特异性抗体进行 Western Blot 交叉验证。

互作功能验证：采用表面等离子体共振（SPR）或固相 ELISA 评估其与重组 PHEX 蛋白的结合活性。

CoA 出厂报告：每盒随货提供包含批号、实际纯度、内毒素实测值与建议储存条件的分析证书。

七、使用指南

7.1 复溶步骤（Reconstitution）

注意：开瓶前请务必先将离心管置于台式离心机中，以 ≥3000×g 瞬时离心 30 秒，使粘附在管壁及管帽上的冻干粉末集聚于管底。

复溶浓度：推荐加入无菌蒸馏水或超纯水，将蛋白复溶至 0.1–0.5 mg/mL（例：向 20 μg 冻干粉中加入 100 μL 无菌水，即得 0.2 mg/mL 母液）。

温和溶解：室温静置 10–15 分钟使其充分水化。酸性糖蛋白溶解过程中易发生分子间缠绕，请勿剧烈涡旋（Vortex），可轻柔颠倒或轻微摇晃混匀。

澄清处理：复溶后如微有清亮胶体悬浮物，属糖蛋白正常水化过程，可置于 4 ℃ 静置 30 分钟或 10000×g 轻微离心 1 分钟取上清使用。

7.2 典型应用与起始浓度推荐

结合互作实验（SPR / BLI / Pull-down）：作为捕获蛋白，利用 C 端 10×His 偶联至 NTA 芯片，起始浓度推荐 5–20 μg/mL；作为流动相分析物，配制 10–500 nM 的梯度浓度与偶联在芯片上的 PHEX 蛋白进行亲和力测定。

成骨分化与矿化抑制实验：在 MC3T3-E1 或原代成骨细胞的矿化诱导培养基（含 β-甘油磷酸钠及维生素 C）中，添加 FX0689 重组蛋白（推荐终浓度梯度：0.1, 1, 5, 10 μg/mL）。培养 14–21 天后进行茜素红（Alizarin Red S）或 Von Kossa 钙结节染色，定量评估其对矿化的抑制效应。

抗体制备与 ELISA 标准品：作为免疫原，每次动物免疫建议用量为 20–50 μg/只（搭配佐剂）；作为 ELISA 包被抗原，推荐包被浓度为 0.5–2.0 μg/mL（pH 9.6 碳酸盐缓冲液）。

7.3 保存与稳定性

冻干粉状态：于 -20 ℃ 至 -80 ℃ 干燥避光保存，保质期 12 个月。

复溶后母液：短期使用，4 ℃ 无菌条件下可保存 2–7 天。长期保存，必须用含 0.1% BSA 或 5% 蔗糖/甘露醇的无菌 PBS 稀释分装，置于 -80 ℃ 冻存，可保存 3–6 个月。

禁忌：切勿反复冻融（Avoid repeated freeze-thaw cycles）。

7.4 注意事项

本产品仅供科研使用（RUO），不可用于临床诊断、治疗或人体输入。

标签评估：C 端的 10×His 标签紧邻 C 端 ASARM 模体，在开展极端精细的 ASARM–PHEX 位点空间位阻研究时，建议结合无标签多肽进行对照验证。

八、应用场景

骨/牙本质体外生物矿化调控机制：探究全长 MEPE 及其衍生 ASARM 肽对羟基磷灰石沉积的抑制效能。

低磷性病理代谢研究：建立 PHEX–MEPE–FGF23 相互作用模型，模拟 XLH 及 TIO 等低磷血症中的矿化障碍。

成骨细胞与干细胞分化调控：评估 MEPE 对 BMSC（骨髓间充质干细胞）成骨分化标志物（ALP、Runx2、OCN）表达的影响。

蛋白-蛋白相互作用（PPI）分析：验证 MEPE 与 PHEX、整合素（Integrin αvβ3）及其他 SIBLING 家族蛋白的结合动力学。

抗体研发与检测试剂盒开发：作为免疫原制备单克隆/多克隆抗体，或作为双抗体夹心 ELISA 试剂盒中的定量标准品。

骨组织工程与再生医学材料：作为功能性基质成分融入水凝胶或骨支架材料，调控局部矿化速率。

九、常见问题（FAQ）

Q1：为什么 MEPE 的 SDS-PAGE 表观分子量（82 kDa）远高于其预测肽链分子量（57 kDa）？

答：这是 SIBLING 家族骨基质糖蛋白的典型特征。主要有两个原因：糖基化修饰，HEK293F 系统赋予了 MEPE 丰富的 N-糖基化和 O-糖基化修饰；电泳迁移率异常，MEPE 序列中富含带负电荷的酸性氨基酸（天冬氨酸、丝氨酸），会排斥 SDS 的结合，导致蛋白在电泳中的迁移速率减慢，表现出比实际氨基酸骨架更大的表观分子量。

Q2：MEPE 在骨研究中究竟是促进矿化还是抑制矿化？

答：MEPE 主要发挥矿化抑制与平衡调控作用。全长 MEPE 及其剪切释放的磷酸化 ASARM 肽均能结合羟基磷灰石晶体，阻止矿化结节过快或无序沉积。在体外诱导实验中，加入微量 MEPE 通常会引起钙结节形成减少（即矿化抑制），这属于其正常的生理调控功能。

Q3：原核表达（E. coli）的 MEPE 短片段与本产品有何本质区别？

答：原核表达的 MEPE 无任何糖基化修饰，且通常只能表达不含疏水区或较短的肽段，容易发生错折叠与沉淀；本产品（FX0689）由 293F 真核细胞表达，涵盖 Pro18–Asp525 近全长，保留了天然的糖链结构与高水溶性，能更真实地模拟体内分泌型 MEPE 的生理功能。

Q6：复溶后出现极微量浑浊该如何处理？会影响活性吗？

答：高度糖基化的酸性蛋白在复溶初期由于水化层重建，可能偶见微微浑浊。建议在 4 ℃ 下静置 30 分钟，并用枪头轻轻吹打混匀。若仍有微量不可溶颗粒，可于 10000×g 离心 1 分钟，取上清液使用，此过程不会对溶解在溶液中的活性蛋白浓度与结合功能产生影响。