一、产品概述
产品全称:Anti-GLUT1 Antibody, Rabbit Monoclonal(GLUT1 兔单克隆抗体)
一句话定位:专为葡萄糖转运蛋白 1(GLUT1)设计的高亲和力兔单克隆一抗,全面覆盖 WB、IHC/IHF、IF、FCM 四大实验平台,高度匹配人(Human)、小鼠(Mouse)和大鼠(Rat)样本检测。
核心卖点速览:
【兔单克隆】高亲和力与高特异性,本底背景极低
【精细表位】合成多肽免疫原,表位明确且批间高度一致
【全景验证】覆盖 WB / IHC / IHF / IF / FCM 四大常规应用
【广谱反应】人、小鼠、大鼠三物种交叉反应全面验证
【液态稳定】纯化抗体搭配甘油防护配方,-20 ℃ 长期保存不失活
二、靶标背景:GLUT1 是什么
1. 分子身份
GLUT1(Glucose Transporter 1)是由 SLC2A1(Solute Carrier Family 2 Member 1)基因编码的 12 次跨膜糖蛋白(UniProt: P17142),属于易化扩散葡萄糖转运蛋白家族(GLUTs)。该蛋白在细胞膜上形成具有构象柔性的跨膜通道,介导葡萄糖顺浓度梯度的跨膜转运。
2. 生理功能
基础糖摄取:负责维持哺乳动物绝大多数细胞的基础葡萄糖摄取(Basal Glucose Uptake)。
组织屏障转运:在血脑屏障(BBB)的脑微血管内皮细胞以及成熟红细胞的细胞膜上呈极高水平表达,是维持中枢神经系统能量供应的关键分子。
稳态调节:调控组织微环境中的葡萄糖浓度梯度,参与细胞糖酵解代谢流的初始限速过程。
3. 科研与临床意义
肿瘤代谢(Warburg 效应):在重编程的肿瘤细胞中,由于 HIF-1α 激活或抑癌基因缺失,GLUT1 表达显著上调,以满足恶性肿瘤快速增殖时的“重糖酵解”需求。GLUT1 的高表达与多种实体瘤(如肺癌、乳腺癌、结直肠癌、脑胶质瘤等)的侵袭、转移及不良预后密切相关。
代谢性疾病:在糖尿病、胰岛素抵抗以及心肌缺血/再灌注损伤研究中,GLUT1 的表达与膜定位改变是调控组织代谢适应的重要指标。
罕见病与神经遗传病:SLC2A1 基因突变会导致 GLUT1 缺乏症(De Vivo 综合征),临床表现为难治性婴儿癫痫、发育迟缓及发育性运动障碍。
4. 检测价值小结
GLUT1 的表达水平及其在细胞膜上的空间定位分布,是定量评价肿瘤糖酵解活性、病理组织分级、血脑屏障完整性以及代谢阻断靶向药物研制的核心生物标志物。
三、产品设计与核心优势
兔单克隆技术(Rabbit Monoclonal)
相比于鼠单抗,兔免疫系统可识别更丰富的表位,亲和力通常高出 1–2 个数量级(Kd 达 10⁻¹⁰~10⁻¹² M);相比于多克隆抗体,重组表达的单克隆抗体能消除批次间差异,确保科研实验的可重复性。
重组多肽免疫原(Synthetic Peptide Immunogen)
设计来源于人 GLUT1 蛋白特定保守区(非跨膜区片段)的合成多肽作为免疫原,有效避免了与其同源蛋白(如 GLUT2, GLUT3, GLUT4)的交叉反应,确保高度靶向特异性。
四大应用平台深度验证
经过严格的 Western Blot(WB)、组织免疫组化/免疫荧光(IHC/IHF)、细胞免疫荧光(IF)以及流式细胞术(FCM)全流程实测验证,确保每种应用场景下的信号清晰、背景干净。
稳定高效的保护体系
抗体采用高纯度 Protein A/G 亲和纯化,配制于含 50% 甘油的 PBS 缓冲体系中。甘油保护剂可防止在 -20 ℃ 储存时产生冰晶,最大程度保护抗体三级结构与抗原结合活性。
四、产品规格与型号
产品规格与型号一览表
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规格货号 |
Packaging Size |
适用场景建议 |
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FA1063220 |
20 μL |
预实验探索、小批量试用、单次课题验证 |
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FA1063250 |
50 μL |
常规课题组常用规格,性价比优选 |
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FA10632100 |
100 μL |
大型课题、多平台平行检测、公共平台备货 |
注:以上价格为中国大陆地区人民币参考报价;实际成交价与优惠政策以官网在线报价或授权代理商最终确认结算为准。
五、技术参数总表
技术参数总表
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参数项目 |
参数详情 |
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抗体类型 |
Rabbit Monoclonal Antibody(兔单克隆一抗) |
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克隆性 |
Monoclonal(单克隆) |
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宿主 / 来源 |
Rabbit(兔) |
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抗体类别 |
Primary Antibody(一抗) |
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靶标名称 |
GLUT1 / SLC2A1 / Erythrocyte/brain glucose transporter |
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反应物种 |
Human(人)、Mouse(小鼠)、Rat(大鼠) |
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免疫原 |
A synthesized peptide derived from human GLUT1(人 GLUT1 来源合成多肽) |
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纯化形式 |
Affinity-chromatography purified(亲和层析纯化) |
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缓冲体系 |
PBS (pH 7.4), 0.05% Sodium Azide, 0.05% BSA, 50% Glycerol |
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应用范围 |
WB, IHC-P, IHF, IF, FCM |
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UniProt 编号 |
P17142 (Human) |
六、推荐稀释比例与实验要点
推荐稀释比例与实验要点一览表
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应用平台 |
推荐稀释范围 |
工作浓度起始建议 |
关键实验要点提示 |
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WB |
1:1000 – 1:2000 |
1:1000 |
1. 样本变性建议:50 ℃ 孵育 20 min 或 70 ℃ 孵育 10 min;避免 100 ℃ 煮沸,防止多跨膜蛋白发生严重疏水聚集导致无法进入凝胶。2. 推荐使用 5% 脱脂奶粉或 3% BSA 封闭 1 小时。 |
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IHC / IHF |
1:50 – 1:200 |
1:100 |
1. 石蜡切片脱蜡后,推荐使用 Citrate Buffer (pH 6.0) 或 EDTA (pH 9.0) 进行热诱导抗原修复(HIER)(微波加热 15–20 分钟)。2. 搭配 HRP 标记兔聚合物二抗或荧光标记二抗。 |
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IF |
1:50 – 1:200 |
1:100 |
1. 细胞固定:建议采用 4% 聚甲醛(PFA)室温固定 15 min。2. 通透处理:0.1–0.2% Triton X-100 通透 10 min(若仅观察细胞膜表面表达,可适当降低通透强度)。 |
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FCM |
1:20 – 1:100 |
1:50 |
1. 活细胞检测(膜表面表达):直接一抗孵育,无须通透。2. 全细胞检测:先固定通透再孵育抗体。3. 强烈建议设置同型对照(Rabbit IgG Isotype Control)。 |
通用优化提示:上述稀释比例为实验室推荐的基准范围。实际操作时,建议以推荐范围的中值(如 WB 1:1000, IHC 1:100)作为梯度探索的起始点,根据不同样本的内源性表达丰度及显色/荧光系统灵敏度进行上下微调。
七、质量控制(QC)说明
平台特异性验证
每批次抗体均通过严格的标准质控流程(SOP):通过细胞系过表达/ Knockdown 裂解液验证 WB 信号特异性;通过石蜡包埋阳性组织(如红细胞富集组织、脑微血管或肺癌组织)校验 IHC 染色定位。
无菌与无凝集防护
纯化后经 0.22 μm 微孔滤膜无菌过滤;添加高纯度防腐剂(0.05% 叠氮钠)及保护蛋白(0.05% BSA),防止微生物污染与抗体非特异性物理吸附。
随货批次分析报告(CoA)
每盒交付产品均附带该批次专属的质量分析报告(Certificate of Analysis),清楚记载:货号、批次号(Lot No.)、实际抗体浓度、应用验证图像及出厂保存条件。
批间一致性承诺
通过克隆化重组表达生产,确保不同批次抗体的亲和力与特异性波动控制在实验室允许的标准差范围内(CV <5%)。
八、保存与操作指南
1. 储存温度与条件
短期存放(1–2 周内使用):收到后置于 4 ℃ 避光保存,方便随时取用。
长期保存(12 个月以上):收到后按实验单次用量分装,置于 -20 ℃ 保存。配方中含有 50% 甘油,在 -20 ℃ 下液体呈非凝固状态,可有效保护抗体结构。
2. 关键禁忌
严禁反复冻融(Avoid Freeze/Thaw Cycles)!反复冰冻与融化会导致抗体蛋白质变性、形成微沉淀并降低结合亲和力。
严禁存放于无霜冰箱(无霜冰箱的自动除霜循环会导致温度剧烈波动)。
3. 操作建议
开盖前离心:每次使用前,请将抗体管放入微量离心机,10,000 × g 离心 20–30 秒,使管壁与管帽上的液体沉降至管底,避免损失。
活细胞/细胞培养实验注意事项:抗体缓冲液中含有 0.05% 叠氮钠(Sodium Azide),具有细胞毒性。若将本抗体用于活细胞处理、细胞刺激或无菌培养体系,必须提前使用透析袋或超滤柱除去叠氮钠成分。
九、典型应用场景
肿瘤组织 GLUT1 免疫组化(IHC)表达分析:对比癌组织与癌旁正常组织的染色强度区别;评估肿瘤组织内细胞膜 GLUT1 的表达阳性率,辅助肿瘤恶性分级与代谢分型。
细胞水平糖代谢特征与膜定位研究(IF):利用免疫荧光技术观察缺氧(Hypoxia)、营养剥夺或药物干预后,GLUT1 从内质网/高尔基体向细胞膜(Plasma Membrane)转运的动态过程。
基因干预(KD/KO/OE)效应验证(WB):采用 siRNA/shRNA 敲低或 CRISPR/Cas9 敲除 SLC2A1 后,通过 Western Blot 验证蛋白质水平的下调/敲除效率。
流式细胞术(FCM)高通量检测:定量分析复杂细胞群体(如肿瘤微环境中的免疫细胞、干细胞)中 GLUT1 阳性细胞群体的百分比及其平均荧光强度(MFI)。
疾病模型机制探究:应用于 Warburg 效应机制、糖尿病血管并发症、血脑屏障损伤以及 De Vivo 综合征等相关课题中的靶蛋白表达量监测。
十、常见问题(FAQ)
Q1:本抗体适合哪些样本类型?
答:本抗体适用于人、小鼠和大鼠来源的各类培养细胞裂解液、石蜡包埋组织切片(FFPE)、冰冻切片(Frozen sections)以及活/固定细胞悬液。
Q2:为什么 WB 检测到的 GLUT1 条带呈弥散状,且分子量大于理论预测值?
答:GLUT1 是典型的多重 N-糖基化跨膜蛋白。其理论氨基酸骨架分子量约为 49 kDa,但由于在内质网与高尔基体中加工附带了不同程度的糖链,在 SDS-PAGE 上通常呈 50–60 kDa 之间的弥散条带,这属于正常现象。若使用 PNGase F 脱糖基化酶处理样本,条带将回归至 49 kDa 附近。
Q3:为什么 WB 样本变性时建议不要煮沸(100 ℃)?
答:GLUT1 具有 12 个强疏水性的跨膜 alpha-螺旋结构。在 100 ℃ 剧烈加热下,疏水区域极易发生不可逆的疏水相互作用,导致蛋白质分子高度聚集沉淀(Aggregates),最终无法进入 SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶。推荐采用 50 ℃ 孵育 20 min 或 70 ℃ 孵育 10 min 的温和变性条件。
Q4:配方中的叠氮钠(Sodium Azide)成分是否会影响实验?如何处理?
答:0.05% 叠氮钠作为抑菌剂,对 WB、IHC、IF 及已固定细胞的 FCM 实验完全没有任何干扰。但如果将抗体直接用于活细胞功能阻断、活细胞长时间孵育或辣根过氧化物酶(HRP)偶联反应时(叠氮钠会不可逆抑制 HRP 活性),请提前使用 10 kDa 截留量的透析袋或超滤离心管,用无菌 PBS 缓冲液置换脱盐 3 次以上。
Q5:如果抗体不慎放置在室温(25 ℃)数天,是否会导致失效?
答:本抗体缓冲液内含有甘油及抑菌剂,并在纯化过程中进行了热稳定性评估。短时间(3–5 天)置于室温下对其结合活性影响极小。但为了保障长期使用的稳定性,收到产品后请务必及时按照本手册第八部分条款的要求移至 -20 ℃ 冷冻保存。