一、产品概述

（一）产品全称与定位

重组人 LR3 胰岛素样生长因子 - 1（Recombinant Human Long R3 IGF-1, rhLR3-IGF-1），是人源胰岛素样生长因子 - 1（IGF-1）的高效能工程化重组类似物。本产品专为高要求细胞培养、干细胞维持及生物制药研发设计，完全无标签（Tag free），最大程度保留蛋白的天然折叠结构与生理活性。

（二）一句话价值主张

低内毒素、高纯度、极低 IGFBP 结合率与超强促增殖活性，助力打造稳定高效的无血清 / 低血清细胞培养与生物制造体系。

（三）适用人群与领域

1. 细胞生物学研究人员：原代细胞培养、细胞凋亡与增殖机制研究。

2. 干细胞与类器官专家：iPSC、MSC、NSC 等干细胞的体外扩增、多能性维持及三维类器官构建。

3. 生物制药与工业客户：CHO、HEK293 等悬浮表达细胞株的工业化无血清培养与生物反应器工艺优化。

二、产品背景与生物学功能

（一）IGF-1 的生理作用

胰岛素样生长因子 - 1（Insulin-like Growth Factor-1, IGF-1）是一种由 70 个氨基酸组成的单链多肽，在体内的细胞生长、分化与存活调控中发挥核心作用。IGF-1 通过结合细胞表面的特异性受体 IGF-1R（酪氨酸激酶受体），激活下游 PI3K-Akt 和 Ras-MAPK 信号通路：

1. 强效促细胞增殖：驱动细胞由 G1 期进入 S 期，促进 DNA 合成与克隆形成。

2. 显著抑制细胞凋亡：上调 BCL-2 家族抑凋亡蛋白，保护细胞免受无血清或营养匮乏应激诱导的死亡。

3. 诱导定向分化：在肌肉、骨骼、神经及造血系统发育中诱导前体细胞分化。

（二）LR3-IGF-1 的工程化设计原理

在体外细胞培养体系或细胞分泌物中，通常存在高亲和力的胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBPs）。天然型 IGF-1 极易与 IGFBPs 结合，导致大部分游离 IGF-1 被“封锁”而无法激活 IGF-1R 受体，极大限制了其促增殖效应。

为解决这一瓶颈，科学家对天然 IGF-1 进行序列改造，设计出 Long R3 IGF-1（LR3-IGF-1）：

1. N 端 13 个氨基酸延伸肽（MFPAMPLSSLFVN）：来自猪生长激素 N 端的疏水性序列，增加分子空间位阻。

2. R3 突变（Glu3Arg / E3R 突变）：将天然 IGF-1 第 3 位的谷氨酸（E）替换为精氨酸（R）。

3. 协同结果：双重改造使 LR3-IGF-1 对 IGFBPs 的结合亲和力降低 1000 倍以上，而对 IGF-1R 受体的结合与激活能力保持不变。培养基中绝大部分 LR3-IGF-1 均保持游离活性状态，生物有效性与培养半衰期大幅提升。

（三）天然型 vs LR3 类似物对比

三、核心产品优势

1. 高纯度（Purity ≥95%）：经 SDS-PAGE 电泳与高效液相色谱（SEC-HPLC）双重确证，无杂蛋白干扰。

2. 低内毒素（Endotoxin ≤10 EU/mg）：使用动态浊度法 LAL 检测，防止内毒素引发细胞非特异性炎症或应答。

3. 无标签（Tag-free）：不引入外源 His-tag、GST-tag 等亲和标签，避免标签空间位阻影响受体二聚化。

4. 超高生物活性：采用无血清 MCF-7 细胞增殖模型实测，ED50 达到 ng/mL 至 sub-ng/mL 级别。

5. 双表达系统灵活可选：提供 HEK293（FD0045）表达的天然型与 CHO（FD0046）表达的高活性 LR3 类似物，全面覆盖基础科研与工业生产需求。

四、产品型号与规格

（一）产品系列对比与选型指南

1. FD0045 系列（HEK293 表达，7.7 kDa，天然型）：适合探究天然 IGF-1/IGFBP 相互作用机制、天然受体结合动力学及基础生理功能研究。

2. FD0046 系列（CHO 表达，9.0 kDa，LR3 类似物）：适合无血清/低血清细胞培养、干细胞扩增、类器官构建及工业生物制造，以极小剂量实现强劲促增殖效果。

（二）货号与规格列表

五、技术参数总表

六、质量控制与检测方法

苏州丰度蛋白建立了一套严格的重组蛋白质量控制与放行体系：

1. 纯度确证：通过 SDS-PAGE 考马斯亮蓝染色与 SEC-HPLC 判定，无杂蛋白条带及可溶性聚合物。

2. 内毒素检测：采用动态浊度法 LAL 鲎试剂检测，确保产品放行标准低于 10 EU/mg。

3. 生物活性定量：采用无血清条件下 MCF-7 人乳腺癌细胞增殖实验。以梯度浓度的 rhLR3-IGF-1 刺激细胞，培养 72 小时后采用 CCK-8/MTT 检测活细胞密度，拟合 S 型剂量-反应曲线，计算得到 ED50 ≤ 1.5 ng/mL（FD0046）。

4. 批次放行：每批次产品均出具独立的 CoA（分析合格报告）。

七、使用指南

（一）规范复溶步骤（Reconstitution Protocol）

1. 离心沉降：在开封前，将冻干粉微量管于 10,000 rpm 下离心 30 秒，使粘附于管盖或管壁上的冻干粉沉降至管底。

2. 复溶溶剂：推荐使用无菌去离子水或 0.1 M 稀醋酸（pH 2.0-3.0，用于长期高浓度高稳定性保存），将蛋白复溶至 0.1–1.0 mg/mL 的母液浓度。

3. 温和溶解：室温静置 5–10 分钟，通过轻轻颠倒管身或反复吹打混匀。避免剧烈涡旋（Vortex），防止产生气泡导致蛋白剪切变性。

（二）推荐工作浓度

1. 一般细胞培养/促增殖：1–20 ng/mL（FD0046 系列）。

2. 无血清干细胞维持/扩增：10–50 ng/mL。

3. 工业悬浮细胞系（CHO/293）：50–200 ng/mL。

注：由于不同细胞系对 IGF-1R 的表达量存在差异，首次使用建议在 0.1–100 ng/mL 区间做梯度预实验。

（三）工作液配置与防管壁吸附

LR3-IGF-1 为低分子量多肽（9 kDa），在极低浓度（<10 μg/mL）下极易吸附于聚丙烯离心管壁。稀释工作液时，建议在培养基或缓冲液中补充 0.1% BSA 或 1% HSA 载体蛋白。

（四）保存条件与稳定性

1. 冻干粉末：在 -20℃ 至 -80℃ 下可稳定保存 12 个月。

2. 复溶母液：4℃ 条件下可短时间保存 1 周；按单次用量分装后置于 -20℃ 或 -80℃ 长期保存，避免反复冻融（冻融次数 ≤3 次）。

八、典型应用场景

（一）无血清 / 低血清细胞培养体系

作为关键生长因子取代胎牛血清（FBS），降低因血清批间差带来的实验波动，显著降低生物制造的原料成本与下游纯化负担。

（二）干细胞与多能干细胞培养

在人多能干细胞（hPSC/iPSC）、间充质干细胞（MSC）及神经干细胞（NSC）的体外培养体系中，LR3-IGF-1 配合 bFGF/Activin A，有效维持干细胞的自我更新能力与未分化多能状态。

（三）工业细胞株开发与生物反应器大规模培养

在 CHO、HEK293、BHK 等工业蛋白表达细胞株的无血清高密度悬浮培养中，添加 20–100 ng/mL 的 LR3-IGF-1 可大幅延长细胞生长期峰值，提高重组抗体及蛋白表达量。

（四）三维类器官（Organoid）与组织工程

在肝类器官、肠道类器官及肌肉/骨骼组织工程三维支架培养中，LR3-IGF-1 促使细胞在 3D 空间内高效增殖并进行形态发生。

 

九、常见问题（FAQ）

Q1：FD0045（天然型）与 FD0046（LR3 类似物）在实验中应该如何选择？

若您的目标是培养细胞、提高细胞密度、替代血清或构建无血清培养基，强烈推荐选择 FD0046 (LR3 IGF-1)，因其 ED50 较天然型低几十倍且不易被细胞分泌的 IGFBP 中和；若您的目标是研究内源性 IGF-1 与 IGFBP 结合蛋白的相互作用、受体代谢等基础机制，请选择 FD0045（天然型）。

Q2：LR3-IGF-1 复溶后可以保存多久？

使用无菌水复溶后，在 4℃ 下可保存约 1 周。若分装后在 -20℃ 或 -80℃ 下保存，可稳定保持活性 3–6 个月。若复溶于 10 mM 稀醋酸（pH 2-3）并含有 0.1% BSA，在 -80℃ 下稳定性更佳。

Q3：本产品能否直接用于动物体内（In Vivo）实验？

本产品纯度 ≥95%，内毒素 ≤10 EU/mg，主要用于 In Vitro 细胞培养与科研诊断研究。若需开展动物体内药代动力学（PK）或功效学实验，请联系我们获取更低内毒素（如 ≤1 EU/mg）的体内专用定制批次。

Q4：是否提供定制表达、荧光标记或生物素化（Biotinylation）服务？

提供。苏州丰度蛋白可根据您的需求提供带有定点生物素化（Biotin-tagged）或荧光标记的 LR3-IGF-1，便于开展受体结合动力学及流式细胞检测。