1. 产品简介（Product Overview）
1.1 产品定位
重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子（Recombinant Human Heat Stable bFGF）是通过定点理性分子改造与高保真重组表达技术制备的高耐受性细胞因子，专为干细胞未分化培养、组织工程细胞扩增及体外微环境构建等高难度科研细胞培养场景研发。
1.2 产品全称与标识
· 中文全称：重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子
· 英文全称：Recombinant Human Heat Stable Basic Fibroblast Growth Factor
· UniProt编号：P09038（Human）
1.3 适用领域概览
· 干细胞生物学：人胚胎干细胞（hESC）、人诱导多能干细胞（hiPSC）、间充质干细胞（MSC）及神经干细胞（NSC）的体外长期扩增与未分化多能性（Stemness）维持；
· 细胞动力学研究：成纤维细胞、内皮细胞、平滑肌细胞等靶细胞的体外促有丝分裂、定向迁移与分化调控；
· 组织工程与再生医学：血管生成（Angiogenesis）模型构建、创面损伤修复及三维类器官（Organoids）培养；
· 靶向药物发现：FGFR信号转导阻断剂筛选及受体相互作用机制研究。
2. 产品特点与核心优势（Features & Benefits）
· 热力学高稳定性：经37℃连续孵育72小时后仍保留85%以上生物活性，耐受运输与常规实验操作中的短暂温度波动；
· 无标签设计（Tag-Free）：采用天然氨基酸序列末端切除技术，分子不含His、Flag或GST等人工亲和标签，杜绝标签基团对受体结合空间位阻的影响，免疫原性干扰低；
· 超高纯度保障（Purity ≥95%）：经反相HPLC与还原/非还原SDS-PAGE双重严控，有效消除杂蛋白干扰；
· 严格内毒素控制（Endotoxin ≤10 EU/mg）：采用专用内毒素脱除填料层析，极低内毒素残留，避免触发敏感细胞内源性免疫应答或炎性坏死；
· 高均一性与原核表达经济性：依托E. coli工程菌大规模高密度发酵平台，批间差极低，性价比优异；
· 明确可测的高活性效价：经过NIH3T3促增殖标准生物检定，半数有效浓度（ED50）严格控制在2.0 ng/mL以内。
3. 产品规格与订购信息（Ordering Information）
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母品号 |
订购货号 |
产品中文名称 |
规格 |
包装形式 |
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FD0002 |
FD000210 |
重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子 |
10 μg |
冻干粉（含保护剂） |
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FD0002 |
FD000250 |
重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子 |
50 μg |
冻干粉（含保护剂） |
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FD0002 |
FD00021000 |
重组人热稳定碱性成纤维细胞生长因子 |
1 mg |
冻干粉（含保护剂） |
4. 技术参数（Specification）
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指标项 |
参数标准（Specification） |
检测方法/依据 |
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物种来源（Source） |
人源（Human）基因重组设计 |
— |
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分子量（Molecular Weight） |
约17.0 kDa（单体） |
SDS-PAGE / 理论计算 |
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氨基酸区段（Region） |
Pro 143 – Ser 288，覆盖154 aa核心活性区 |
— |
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表达系统（Expression Host） |
大肠杆菌表达系统（E. coli）重组工程菌 |
— |
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亲和标签（Tag） |
无标签（Tag-free）序列确认 |
— |
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外观性状（Appearance） |
白色疏松冻干粉块或细末 |
目测 |
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纯度（Purity） |
≥95% |
还原性SDS-PAGE致密单带 |
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内毒素（Endotoxin） |
≤10 EU/mg（即≤0.01 EU/μg） |
鲎试剂动态显色法（LAL） |
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生物学活性（Bioactivity） |
ED50 ≤2.0 ng/mL |
NIH3T3细胞有丝分裂增殖分析 |
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冻干保护缓冲液 |
10 mM PB, 250 mM NaCl, 5%甘露醇, 0.01% Tween-80, pH 7.4 |
预脱气超滤配方体系 |
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复溶推荐介质 |
无菌无核酸酶去离子水（Sterile ddH₂O） |
详见第7节操作建议 |
5. 配方说明与复溶方法（Formulation & Reconstitution）
5.1 冻干处方各组分作用解析
本品冷冻干燥处方经过严格的热力学与渗透压筛选：
· 10 mM磷酸盐缓冲液（PB, pH 7.4）：提供稳定的中性生理离子微环境，避免蛋白等电点沉淀；
· 250 mM NaCl：维持高离子强度，有效屏蔽强碱性Sema折叠面因表面正电荷集中引发的静电聚沉；
· 5%（w/v）甘露醇（Mannitol）：充当优质冷冻干燥骨架剂与低温构象保护剂，形成疏松冻干骨架，利于水分快速升华并阻隔分子碰撞；
· 0.01%（w/v）Tween-80：表面活性剂，大幅降低疏水作用力，阻止微量重组蛋白在管壁塑料表面的非特异吸附。
5.2 标准复溶操作步骤（SOP）
· 开盖前离心（重要）：开封前必须将包装管在台式微量离心机中以10,000–12,000 rpm瞬时离心30秒，使吸附在管盖及内壁上的冻干粉末全部沉聚至离心管底；
· 加入溶剂：在超净工作台中，向管底轻柔加入足量无菌超纯水（Sterile ddH₂O），推荐复溶母液浓度控制在0.1–1.0 mg/mL（例如：向10 μg规格产品中加入100 μL无菌水即得0.1 mg/mL储存液）；
· 水化与溶解：盖紧管盖，室温静置15–20分钟，使冻干蛋白充分复水水化；
· 轻柔混匀：上下轻缓颠倒混匀或缓慢吹吸使蛋白完全溶解。严禁剧烈涡旋振荡（Vortex），防止机械剪切力破坏蛋白质三级空间结构导致活性失活。
5.3 工作液稀释与分装建议
· 如需将复溶后的母液进一步稀释至极低工作浓度（<0.1 mg/mL），必须使用含载体蛋白（如0.1%无脂肪酸BSA、0.1%人血白蛋白HSA或10%优质胎牛血清FBS）的完全培养基或PBS进行稀释，严禁使用纯水长期储存极微量蛋白；
· 依据单次实验使用量，将母液分装为小体积（如5–20 μL/管），密封后冷冻。
6. 储存与运输（Storage & Shipping）
6.1 保存条件与有效期
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产品物理状态 |
推荐储存环境 |
允许使用期限 |
关键注意事项 |
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未开封冻干粉 |
−20℃至−80℃，干燥密封避光 |
24个月 |
保持管体密封干燥 |
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复溶储存液（母液） |
2℃至8℃无菌冷藏 |
最长7天 |
必须保证完全无菌操作 |
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分装冷冻液（含载体） |
−20℃至−80℃深低温避光 |
3–6个月 |
严格杜绝反复冻融 |
6.2 运输条件
· 得益于分子的热稳定重构设计，本品冻干粉可耐受中短途环境温度。常规发货采用高密度生物冰袋（Blue Ice, 0–4℃）包装冷链发运；
· 到货接收后，请立即核对包装完整性，于12,000 rpm下短暂离心，并迅速转移至−20℃或−80℃冰箱中长期储存。
7. 应用场景与推荐工作浓度（Applications）
针对不同细胞类型与研究目的，建议在以下推荐工作浓度区间内进行预实验优化：
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研究领域 / 细胞模型 |
推荐工作浓度 |
主要功能与预期表型 |
培养基换液周期 |
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人多能干细胞（hiPSC / hESC） |
4–10 ng/mL |
协同维持未分化干性，抑制自发分化 |
可实现48–72小时间隔换液 |
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间充质干细胞（BM-MSC / UC-MSC） |
5–10 ng/mL |
显著加速细胞扩增速度，延长体外传代寿命 |
2–3天换液一次 |
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神经干细胞 / 祖细胞（NSC / NPC） |
10–20 ng/mL |
维持神经球未分化状态，促进前体细胞增殖 |
隔天半量换液 |
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血管内皮细胞（HUVEC） |
2–10 ng/mL |
诱导管腔微结构形成，促进迁移 |
24–48小时换液 |
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创伤愈合与成纤维细胞扩增 |
1–5 ng/mL |
刺激胶原分泌，加速划痕愈合闭合 |
常规换液 |
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三维类器官（Organoids）培养 |
10–40 ng/mL |
提供基质生成与干细胞巢重建信号 |
依据类器官生长动态添加 |
8. 使用注意事项（Precautions）
· 产品用途限制：本品仅供科学研究、体外细胞培养及实验教学使用（For Research Use Only, RUO）。严禁用于任何人体临床诊断、注射治疗、食品添加剂、化妆品开发或家庭使用；
· 个人生物安全防护：本品为重组活性生物蛋白，使用时请穿戴实验服、防护口罩并佩戴乳胶/丁腈手套，于II级生物安全柜或超净工作台中进行规范无菌操作，防止环境或微生物污染；
· 防止剪切与热变性：尽管本品具备出色的热稳定特性，但在操作过程中仍须避免频繁剧烈机械振荡（Vortexing），并远离超过55℃的局部高温热源；
· 反复冻融防范：严禁对解冻后的工作液进行多次（>2次）反复冻融，冰晶反复形成会导致蛋白三维二级结构不可逆变性并形成微细沉淀；
· 废弃物合规处置：使用后的移液枪头、离心管等塑料接触耗材，应视同常规生物活性废弃物，经高压蒸汽灭菌或浸入84消毒液处理后，统一交由专业医疗固废机构合规处理。
