一、产品描述与生物学特性

重组人FGF-10/KGF-2（Recombinant Human FGF-10/KGF-2）由真核或原核表达系统重组表达制备。天然成熟的人FGF-10蛋白含有约170个氨基酸，分子量约为19.3 kDa。

与FGF-7（KGF-1）类似，FGF-10主要由间充质来源的细胞（如成纤维细胞）合成，其靶标精准定位于表达特异性IIIb剪接变体受体（FGFR2b）的上皮细胞。

作为国内高品质重组蛋白与细胞培养原料的专业供应商，苏州丰度生物有限公司推出的重组人FGF-10/KGF-2产品具备以下优势：

· 高生物学活性：经BaF3/FGFR2b转染细胞或4MBr-5细胞增殖实验严格验证，ED50通常小于5 ng/mL。

· 高纯度保证：通过SDS-PAGE与SEC-HPLC双重检测，纯度均大于95%。

· 严格的内毒素控制：采用LAL法检测，内毒素水平低于0.1 EU/μg，最大程度排除外源因子对干细胞与原代细胞分化的干扰。

二、实验原理

在体外细胞模型及类器官构建中，FGF-10通过与靶细胞膜表面的特异性硫酸乙酰肝素蛋白多糖（HSPGs）和受体FGFR2b形成稳定的三元复合物，诱导受体二聚化及胞内酪氨酸激酶结构域自磷酸化。

受体活化后主要经由以下途径发挥调控作用：

· MAPK/ERK级联通路：直接诱导细胞周期素表达，促进上皮前体细胞和角质形成细胞的有丝分裂与增殖。

· PI3K/Akt信号通路：抑制促凋亡蛋白活性，显著增强受损伤上皮细胞在应激状态下的存活率。

· 细胞骨架重组：促进上皮-间质相互作用（EMI），引导细胞极性重塑与定向迁移，为三维类器官的形态发生（如分支生成）提供基础生物化学信号。

三、实验所需试剂与耗材

为了确保重组蛋白的高回收率和活性稳定性，请提前准备以下试剂与耗材：

主要仪器：微量冷冻离心机、超净工作台、-80°C超低温冰箱（需预冷至4°C）。

四、实验前准备：复溶与分装标准流程

低浓度多肽蛋白极易吸附在塑料管壁，不当操作将造成高达50%以上的蛋白损耗。推荐按照苏州丰度生物研发部技术规程进行复溶：

4.1 瞬时离心

从冰箱取出冻干粉试剂盒，在室温回温5分钟以防止吸潮。开盖前，必须以 10,000–12,000 rpm 离心30秒，使管壁附着的冻干粉沉降至管底。

4.2 母液制备

· 加入推荐体积的无菌超纯水或含0.1% BSA的PBS，建议配制为 0.1–1.0 mg/mL 的储备液。

· 严禁涡旋震荡：使用移液枪缓慢吹吸10–15次，或置于冰上静置15–20分钟使其温和溶解。

4.3 工作分装

· 将溶解后的蛋白母液用低吸附离心管按单次实验用量分装（建议每管5–20 μL），以避免频繁冻融。

· 若后续实验需无血清体系（如临床级分化），推荐使用0.1% HSA或海藻糖作为保护载体。

五、全流程注意事项及实验关键控制点

5.1 规避反复冻融

FGF-10对冻融过程中的冰晶剪切极为敏感，每次冻融循环会导致生物活性大幅下降（约15%–30%）。分装后的冻干复溶液在-80°C可稳定保存3–6个月；在4°C条件下保存建议不超过一周。

5.2 吸附损失控制

FGF-10具有强阳离子表面电荷特征，极易与未处理聚丙烯塑料壁发生非特异性吸附。配置极低工作浓度（如工作液 <10 ng/mL）时，培养基中必须含有血清或至少0.1% BSA载体蛋白。

5.3 肝素协同效应

FGF-10依赖类肝素结构的协同以激活FGFR2b。在无血清或低血清的类器官基质胶培养体系中，建议配合加入外源性低浓度肝素（如1–5 μg/mL），可显著增强FGF-10的热稳定性与受体结合亲和力。

5.4 工作浓度摸索

· 角质形成细胞/表皮损伤迁移实验推荐浓度：10–50 ng/mL；

· 肺上皮类器官（Lung Organoids）维持及分枝诱导推荐浓度：20–100 ng/mL；

· 各实验室应根据使用的基础培养基及细胞株受体表达丰度进行梯度滴定（如0, 5, 10, 20, 50, 100 ng/mL）。

六、技术支持与服务

苏州丰度生物有限公司始终立足于生命科学前沿，聚焦高活性细胞因子、重组生长因子及科研级酶制剂的自主研发与产业化。

公司依托完善的蛋白工程平台与严苛的质控体系，确保每一批出厂的FGF-10/KGF-2活性高、批间差小、稳定性强，为广大科研院所、药物研发企业及类器官研究团队提供坚实的供应链保障与专业技术支持。

如需索取产品COA、大包装定制或应用方案咨询，请联系丰度生物技术服务团队。