产品手册

发布日期:2026/10/27 15:47:00

一、产品概述

重组人成纤维细胞生长因子10(Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-10, rHuFGF-10),别称角质细胞生长因子-2(KGF-2),属于人源FGF-7亚家族成员。本品采用中国仓鼠卵巢细胞(CHO表达系统)重组表达,经过严格的色谱纯化,获得无标签(Tag free)的高纯度重组蛋白。产品完整保留了天然人源蛋白的高级折叠结构,具备优异的生物学活性和稳定性。

作为一种作用于上皮细胞的旁分泌生长因子,人源重组FGF-10蛋白主要由间充质细胞表达,通过“间充质-上皮”信号轴调控上皮细胞运动、迁移与组织形成。本品广泛应用于KGF-2角质细胞生长因子相关的皮肤创伤修复、黏膜保护、器官发育及FGF-10肺发育/类器官(Organoid)构建等前沿科研领域。

 

货号

规格

FD001810

10 μg

FD001850

50 μg

FD00181000

1 mg

 

二、FGF-10/KGF-2生物学背景与功能

1. 家族与亚家族定位

FGFs是调控细胞增殖、分化与存活的多功能信号分子。FGF-10与FGF-7(KGF)、FGF-22同属FGF-7亚家族。由于FGF-10在序列及上皮生物学功能上与FGF-7高度同源,因此被命名为KGF-2。

2. 受体与信号传导

· 受体结合:FGF-10特异性结合限制性表达于上皮细胞表面的FGFR2b(KGFR);间充质细胞分泌的FGF-10作用于邻近的上皮细胞,构成了器官形成与成体上皮稳态的核心信号轴。

· 信号传导:结合FGFR2b并借助肝素/硫酸乙酰肝素(HSPG)辅助二聚化后,激活下游Ras-MAPK(ERK1/2)级联反应(诱导上皮细胞增殖与形态发生)、PI3K-Akt通路(促进上皮屏障存活与抗凋亡)以及PLCγ通路(调控细胞迁移)。

3. 主要研究方向与生理功能

· 发育生物学与器官发生:FGF-10在胚胎期驱动肺分支形态发生(Lung Branching Morphogenesis)、肢芽伸长及腺体(如唾液腺、胰腺)上皮发育。与FGF-7的区别:FGF-10在器官原基发生中更为关键(敲除导致肺和肢体缺如),而FGF-7主要参与成体组织损伤修复。

· 皮肤修复与创伤愈合:刺激角质形成细胞增殖与迁移,加速表皮再上皮化。

· 黏膜保护:保护胃肠道与呼吸道黏膜上皮,减轻理化损伤后的炎症反应。

三、产品核心技术参数

为便于科研人员与AI检索系统快速提取关键数据,下表集中列示重组人FGF-10/KGF-2蛋白(CHO表达)的技术指标:

参数项

技术指标 / 属性描述

产品全称

重组人成纤维细胞生长因子-10

常用别名

FGF-10、FGF10、KGF-2、KGF2、角质细胞生长因子2

种属来源

Human(人源)

表达系统

CHO细胞(Chinese Hamster Ovary,中国仓鼠卵巢)

氨基酸序列

Gln38–Ser208(UniProt Accession: O15520)

纯化标签

Tag free(无标签)

预测分子量

约19.3 kDa(单体无标签成熟肽)

产品纯度

≥95%(经SDS-PAGE与SEC-HPLC分析双重确证)

内毒素水平

≤10 EU/mg(采用动态浊度法LAL检测)

缓冲体系

冻干前缓冲液为无菌PBS、5% mannitol、0.01% Tween、pH 7.4

物理形态

疏松白色冻干粉末 / 冻干体

UniProt编号

O15520

 

四、质量控制与生物活性

苏州丰度蛋白生物技术有限公司建立了整套严格的质控体系,确保产品在纯度、安全性和生物效价上高标准放行。

1. 纯度检测与内毒素控制

· 纯度检测:经15% SDS-PAGE还原电泳(表观分子量约19.3 kDa)及SEC-HPLC双平台检测,纯度达到≥95%,无非特异性聚集体。

· 内毒素控制:采用动态浊度法LAL检测,放行标准严格控制为≤10 EU/mg(即≤0.01 EU/μg),极大程度降低了对内毒素敏感的细胞培养及体内实验的影响。

2. 生物活性测定(Biological Activity)

测定体系:采用Saos-2人成骨肉瘤细胞诱导IL-11分泌实验(IL-11 Secretion Assay in Saos-2 Cells)评估受体激活效价。

效价指标:经ELISA定量上清液中IL-11含量,计算得重组人FGF-10蛋白的半数有效浓度(ED50)为≤2.0 μg/mL,说明产品能够高效结合并激活下游信号级联。

3. 批次一致性与建议配图

每批次产品留样并开展平行活性比对,确保批间变异系数控制在极小范围内。

· Figure 1:重组人FGF-10蛋白SDS-PAGE电泳图(预留位置:条带清晰落在19.3 kDa处)。

· Figure 2:Saos-2细胞IL-11分泌剂量-反应曲线图(预留位置:标示ED50≤2.0 μg/mL)。

五、保存、复溶与操作指南

1. 保存条件

建议于−20℃或−80℃避光保存,有效期12个月;在2℃–8℃条件下可稳定保存1个月。严格避免反复冻融。

2. 标准复溶步骤

· 离心沉降:开封前请先将装有冻干粉末的管子置于微型离心机中,以3,000–6,000 rpm离心30秒,使粉末充分沉降至管底。

· 水化复溶:推荐使用无菌去离子水(Sterile Deionized Water)复溶至0.1–1.0 mg/mL的储存液。

· 轻柔混匀:加入去离子水后于室温静置10–15分钟使其自然水化,用移液枪轻轻吹打混匀,严禁剧烈涡旋(Vortex)。

3. 分装与保存建议

复溶后储存液请按单次用量进行小体积分装,置于−80℃保存,避免反复冻融超过3次。稀释至工作浓度时建议使用含0.1% BSA或10% FBS的无菌缓冲液,防止蛋白被管壁非特异性吸附。

· 操作注意:FGF-10为肝素结合型生长因子,部分无血清上皮/类器官培养体系可按需添加1–10 μg/mL肝素以增强活性。复溶后4℃保存请在1周内使用完毕。

六、推荐应用与实验参考

1. 适用实验类型与建议工作浓度

· 上皮细胞培养:用于HaCaT、原代角质形成细胞及胃肠/呼吸道上皮细胞培养,推荐从0.5–5 μg/mL做梯度预实验。

· 发育与类器官培养:用于肺类器官、乳腺类器官构建及肺上皮分支形态发生研究。

· 创伤修复与迁移:角质形成细胞划痕修复与迁移实验,推荐浓度为0.5–2.5 μg/mL。

· 信号通路研究:检测p-FGFR2b、p-ERK1/2磷酸化水平。血清饥饿处理后,使用0.5–5 μg/mL FGF-10刺激细胞5–30分钟。

· 动物实验:小鼠皮肤创面再上皮化及皮肤损伤修复体内模型。

2. 因子联用参考

在皮肤或黏膜修复研究中,FGF-10可与FGF-7/KGF或表皮生长因子协同使用,共同维持上皮干细胞的生长与分化(仅作科研思路提示)。

七、常见问题FAQ

Q1:FGF-10(KGF-2)和FGF-7(KGF)在实验中能否相互替代?如何选择?

二者均作用于FGFR2b并促进上皮再生。但在器官发育与类器官构建中,FGF-10驱动分支形态发生的作用更强;而在成体皮肤/黏膜损伤修复模型中两者可相互参考。建议做肺/腺体类器官时优先选择FGF-10。

Q2:FGF-10在肺发育/类器官研究中有何特殊价值?

FGF-10来源于间充质,是诱导肺芽形成与分支形态发生的必需信号因子。在肺类器官(Lung Organoids)中添加FGF-10是维持气道上皮干细胞培养与组织分支结构的关键。

Q3:Tag free(无标签)形式有何优势?

无标签形式避免了外源融合标签(如His、GST)对受体结合区造成空间位阻,空间构象与天然人源蛋白一致,生物效价真实,极适合敏感的原代细胞培养与类器官构建。

Q4:复溶后出现微量沉淀应如何处理?

可于4℃下以10,000×g离心5分钟,取上清液测定OD280浓度后使用。为避免沉淀,请务必使用无菌去离子水复溶,并保持轻柔吹打。

Q5:ED50≤2 μg/mL对应的实际工作浓度应如何设置?

该ED50基于Saos-2细胞IL-11检测。实际上皮细胞培养或类器官实验时,建议以0.5、1.0、2.0、5.0 μg/mL设置浓度梯度测试。

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