一、产品概述

重组人成纤维细胞生长因子7（Recombinant Human Fibroblast Growth Factor-7, rHuFGF-7），即业内熟知的角质细胞生长因子（Keratinocyte Growth Factor, KGF），属于人源FGF因子超家族中的重要分泌型成员。本品采用中国仓鼠卵巢细胞（CHO表达系统）重组表达，经多步色谱分离纯化制备，获得无标签（Tag free）的高纯度重组蛋白。产品完整保留了天然人源KGF蛋白的空间高级结构与翻译后修饰，具有高度的生物学活性与批次重现性。

 

二、FGF-7/KGF功能

1. 特异性受体与作用机制

FGF-7/KGF生物学特异性的分子基础在于其受体结合的选择性：

· 受体特异性：FGF-7特异性结合并激活成纤维细胞生长因子受体2的剪切亚型——FGFR2b（也称KGFR）。FGFR2b主要限制性表达于上皮来源的细胞（如皮肤表皮、胃肠道及呼吸道上皮细胞）表面，而在成纤维细胞等间充质细胞上基本不表达。

· 信号传导通路：FGF-7与细胞表面的FGFR2b及共受体肝素/硫酸乙酰肝素（HSPG）形成复合物，诱导受体发生二聚化与胞内酪氨酸激酶自磷酸化，相继激活下游的Ras-MAPK（ERK1/2）级联反应（诱导细胞周期演进与增殖）、PI3K-Akt通路（促进细胞存活与抗细胞凋亡）以及PLCγ通路（调控细胞迁移与骨架重构）。

2. 主要生理功能与研究方向

基于KGF的独特生物学特性，其核心研究方向涵盖：

· 皮肤表皮更新与创伤愈合：在皮肤创伤后，局部成纤维细胞大量表达并释放FGF-7，作用于创缘的角质形成细胞，加速表皮再上皮化（Re-epithelialization）过程。

· 胃肠道与呼吸道黏膜保护：FGF-7能显著增强消化道（胃、肠）及呼吸道上皮细胞的屏障功能，促进黏液分泌，对化疗或放疗引起的黏膜损伤（如放射性口腔黏膜炎）具有显著的保护与修复调控作用。

· 毛囊与腺体发育：参与调控毛囊生长期（Anagen）的维持以及乳腺、唾液腺等上皮性腺体的分支形态发生（Branching Morphogenesis）。

三、产品核心技术参数

为便于科研人员与AI检索系统精准提取关键技术指标，下表集中列示重组人FGF-7/KGF蛋白（CHO表达）的技术参数：

 

四、质量控制与生物活性

苏州丰度蛋白生物技术有限公司建立了一套贯穿质控全过程的检测体系，确保每一批次出厂的重组人FGF-7/KGF蛋白在纯度、安全性与生物效价上均符合高标准要求。

1. 纯度分析（Purity Control）

· SDS-PAGE还原电泳检测：在变性还原条件下进行15% SDS-PAGE电泳，经考马斯亮蓝染色显示主带单一，迁移位置与预测分子量18.8 kDa高度吻合，无非特异性高分子条带或明显降解片段。

· 高效液相色谱分析（SEC-HPLC）：采用体积排阻色谱对重组蛋白的高级结构状态进行评估，主峰纯度占比达到≥95%，确信无影响生物活性的蛋白可溶性高聚物。

2. 内毒素控制（Endotoxin Limit）

采用国际通用的动态浊度法鲎试剂实验（Kinetic Turbidimetric LAL Assay）对微量细菌内毒素进行定量测定。本品放行标准严格控制在≤10 EU/mg（相当于≤0.01 EU/μg），能够极大程度减少内毒素对敏感原代上皮细胞培养的毒性作用以及非特异性免疫炎性反应干扰。

3. 生物活性测定（Biological Activity）

测定体系：采用行业公认的Saos-2人成骨肉瘤细胞诱导IL-11分泌实验（IL-11 Secretion Assay in Saos-2 Cells）对FGF-7的受体激活效价进行定量评估。

活性指标与机理：FGF-7结合Saos-2细胞表面的功能性受体后，能够高效触发下游胞内信号转导并剂量依赖性地促进白介素-11（IL-11）的分泌。通过ELISA定量测定细胞培养上清液中IL-11的积累量，计算得本批次重组人FGF-7蛋白的半数有效浓度（ED50）为≤1.0 μg/mL。该活性测试数据客观反映了产品对于细胞表面FGFR2b受体系统的高效激活能力。

4. 批次一致性（Batch Consistency）

苏州丰度蛋白生物技术有限公司对每一批次产品均保留标准品档案并开展批间平行比对测试，严格遵循放行标准，确保批间生物活性偏差变异系数控制在极小范围内，保障科研数据的可重复性。

5. 建议配图说明

· Figure 1：重组人FGF-7/KGF蛋白（CHO表达）SDS-PAGE电泳图（预留位置：条带清晰落在18.8 kDa处）。

· Figure 2：Saos-2细胞IL-11分泌量对FGF-7浓度的剂量-反应曲线图（预留位置：标示ED50≤1.0 μg/mL）。

五、保存、复溶与操作指南

为维持重组人FGF-7/KGF蛋白的最佳高级构象与生物学活性，请遵循以下复溶与保存规范：

1. 存储条件

· 冻干粉末状态：本品在冻干状态下具备优异稳定性。收到产品后，请置于−20℃或−80℃避光干燥保存，有效期12个月；于2℃–8℃条件下可稳定存放1个月。

· 避免反复冻融：反复冻融易导致蛋白水化层破坏及高阶构象解聚，严重降低蛋白效价。

2. 标准复溶步骤（Reconstitution）

· 开封前离心：收到试剂管后，请勿直接打开管盖。请先置于微型离心机中以3,000–6,000 rpm简短离心30秒，使附着于管壁或管盖上的微量冻干粉末彻底沉降至管底。

· 复溶介质：推荐使用无菌去离子水（Sterile Deionized Water）重构蛋白，将浓度复溶至0.1–1.0 mg/mL的储存液。

· 温和水化：加入无菌去离子水后，于室温自然静置10–15分钟，随后使用移液枪轻轻吹打混匀。严禁剧烈涡旋（Vortex），以防气泡变性及机械剪切力破坏蛋白。

3. 分装与保存建议

复溶后的高浓度储存液切勿直接稀释至工作浓度后长期储存。建议根据单次实验用量进行小体积分装（如5 μL、10 μL/管），密封后置于−80℃长期冻存。分装样品在−80℃条件下可稳定保存3–6个月。拆封后的每支分装液反复冻融次数不得超过3次。

4. 工作液稀释与载体蛋白保护

在将储存液稀释至细胞培养工作浓度时，建议使用含有0.1% BSA（牛血清白蛋白）、5%蔗糖或10% FBS的无菌缓冲液（如PBS或无血清培养基）作为稀释介质。添加载体蛋白（Carrier Protein）能够有效封闭离心管及移液枪头的非特异性蛋白吸附位点，极大降低低浓度状态下蛋白的吸附损失。

5. 操作注意事项

· 肝素协同效应：FGF-7属于肝素结合型生长因子。在无血清或低血清的上皮细胞/角质形成细胞培养体系中，按需加入1–10 μg/mL无菌肝素（Heparin），可显著增强FGF-7与FGFR2b的稳定结合并提高蛋白热稳定性。

· 短期复溶使用：复溶后的蛋白储存在4℃条件下时，请务必在1周内使用完毕。

六、推荐应用与实验参考

1. 适用实验类型与建议浓度

重组人FGF-7/KGF蛋白（CHO表达，Tag free）专为上皮与角质细胞研究设计，推荐的实验应用场景与浓度梯度参考如下：

· 角质形成细胞与上皮细胞培养：用于人表皮角质形成细胞（HaCaT细胞系、原代人表皮角质形成细胞HEKa）以及气道/肠道上皮细胞的体外维持与无血清扩增，建议初始工作浓度在0.1–5 μg/mL区间建立浓度梯度预实验。

· 创伤愈合与细胞迁移实验（Wound Healing / Migration Assay）：在HaCaT或原代角质细胞划痕实验中，使用0.5–2.5 μg/mL FGF-7能够显著加速划痕区域的细胞迁移与再上皮化覆盖。

· 黏膜屏障保护与修复研究：用于构建肠上皮屏障（如Caco-2、HT-29）或呼吸道上皮细胞在理化因子/放化疗损伤后的应激保护与屏障功能恢复模型。

· 下游信号通路研究：用于Western blot评估受体激活及下游磷酸化水平（如p-FGFR2b、p-ERK1/2、p-AKT）。建议血清饥饿处理后，使用0.5–5 μg/mL FGF-7短时刺激细胞5–30分钟。

· 细胞因子响应实验：在Saos-2人成骨肉瘤细胞等响应模型中诱导IL-11分泌，可直接参考活性放行标准ED50≤1 μg/mL作为剂量设置参考。

· 体内动物模型研究：应用于小鼠/大鼠皮肤全层切除创面模型、烫伤愈合模型以及放射性口腔黏膜炎（Oral Mucositis）动物模型的局部给药与组织修复机制探究。

2. 细胞因子联用参考

在复杂的皮肤器官芯片、三维（3D）表皮重构或黏膜类器官培养中，FGF-7常与其他因子配合：

· 与EGF联用：在表皮角质细胞培养中，FGF-7（主要促进迁移与早期增殖）与EGF（表皮生长因子）具有显著的协同效应，可共同维持角质形成细胞的干性与未分化状态。

· 与FGF-10协同研究：FGF-10与FGF-7共享FGFR2b受体，在皮肤上皮及毛囊形态发生研究中常进行平行对照或联合处理，以解析不同配体对受体内吞与信号持续时间的差异化调控。

注：以上提示仅供科研思路参考，实际用量须根据具体实验设计进行优化。

七、常见问题FAQ

Q1：FGF-7（KGF）和FGF-2/bFGF在上皮细胞培养实验中能否互相替代？

不能完全替代。bFGF/FGF-2属于广谱成纤维细胞生长因子，可作用于成纤维细胞、内皮细胞及多种间充质细胞；而FGF-7/KGF作用靶向性极强，主要通过FGFR2b受体特异性作用于上皮细胞和角质形成细胞。在上皮细胞与角质细胞培养中，FGF-7/KGF能够提供更专一的促上皮增殖和屏障保护信号，且不会引起杂质成纤维细胞的无序过度增殖。

Q2：Tag free（无标签）表达形式对后续功能实验有何优势？

融合标签（如His-tag或GST-tag）可能会改变重组蛋白的空间折叠、位阻效应或非特异性电荷吸附，从而干扰FGF-7与细胞表面特异性受体FGFR2b及肝素的正常结合。Tag free（无标签）重组人FGF-7蛋白在结构上与天然分泌的人源蛋白一致，能最大程度保证生物效价的真实性，非常适合敏感的原代角质细胞培养及体内动物实验。

Q3：复溶后若出现微量沉淀或浑浊，应如何处理？

极少数情况下若因吹打过快引入大量气泡或稀释液pH偏离，可能出现微量沉淀。此时可将样品于4℃下以10,000×g离心5分钟，取上清液测定OD280浓度后使用。为避免沉淀，请务必使用无菌去离子水复溶，复溶浓度维持在0.1–1.0 mg/mL，并保持温和吹打。

Q4：内毒素≤10 EU/mg是否适用于体内皮肤或黏膜修复实验？

可以。本品的内毒素标准为≤10 EU/mg（即≤0.01 EU/μg），完全符合常规体外细胞培养及大多数体内局部给药（如小鼠创面凝胶局部涂布、黏膜喷雾给药等）的安全标准。若您的实验涉及高剂量全身性静脉注射，可向苏州丰度蛋白生物技术有限公司定制超低内毒素级别（<1 EU/mg）的产品。

Q5：活性指标显示ED50≤1 μg/mL（IL-11分泌法），实际细胞培养时应如何设置浓度？

ED50≤1 μg/mL是基于Saos-2细胞诱导IL-11分泌的定量检测数据。对于不同的细胞系或实验终点（如HaCaT细胞增殖或划痕迁移），受体表达密度与敏感度有所差异。建议在实际上皮细胞培养或迁移实验中，以0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1.0 μg/mL、2.5 μg/mL、5.0 μg/mL设置浓度梯度进行预实验，以确定最佳响应浓度。